Monoklonaler Anti-Human-CD5-Antikörper PE-konjugiert, durchflussvalidiert

Die rationale Entwicklung von CD5-gerichteten biepitopen CARs mit vollständig humanen Nur-Schwerketten-Antigenerkennungsdomänen

T-Zell-Malignome sind eine Gruppe hämatologischer Krebsarten mit hohen Rezidiv- und Mortalitätsraten. CD5 wird in etwa 85 % der malignen T-Zell-Erkrankungen stark exprimiert, obwohl die normale Expression von CD5 auf Thymozyten, T-Zellen und B1-Zellen beschränkt ist. Die CD5-Expression auf chimären Antigenrezeptor (CAR)-T-Zellen führt jedoch zu CAR-T-Zell-Brudermord. Sobald diese Einschränkung überwunden ist, könnte die auf CD5 gerichtete CAR-T-Therapie eine attraktive Strategie zur Behandlung von malignen T-Zell-Erkrankungen sein.

Hier berichten wir über die Auswahl neuartiger CD5-gerichteter vollständig humaner Schwerketten-Variablendomänen (FHVH) für die Entwicklung eines biepitopen CAR mit der Bezeichnung FHVH3/VH1, das FHVH1 und FHVH3 enthält und für die validiert wurde, dass sie an verschiedene Epitope des CD5-Antigens binden . Um Brudermord in CD5-CAR-T-Zellen zu verhindern, haben wir die Herstellungsverfahren eines CRISPR-Cas9-basierten CD5-Knockouts (CD5KO) und die lentivirale Transduktion von Anti-CD5-CAR optimiert. Funktionelle In-vitro- und In-vivo-Vergleiche zeigten, dass biepitope CD5KO-FHVH3/VH1-CAR-T-Zellen eine verbesserte und länger anhaltende Wirksamkeit zeigten; erzeugte mäßige Zytokin-Sekretion; zeigte ähnliche Spezifitätsprofile wie entweder FHVH1, FHVH3 oder das klinisch getestete H65; und eignet sich daher zur Weiterentwicklung.

Einführung

In den letzten Jahren wurden Fortschritte in der Therapie mit chimären Antigenrezeptor-T-Zellen (CAR-T) erzielt, um maligne B-Zell-Erkrankungen anzugreifen, eine Remission zu induzieren und das langfristige rezidivfreie Überleben bei Patienten mit B-Zell-Leukämie und Lymphom zu verbessern.1, 2 , 3, 4, 5 Die Gesamtprognose von refraktären oder rezidivierenden (r/r) T-Zell-Malignomen ist jedoch im Vergleich zu B-Zell-Malignomen viel schlechter, und Salvage-Chemotherapieschemata bleiben die beste Behandlung für Patienten mit r/r T-Zell-Leukämie oder Lymphom.6, 7, 8 Daher ist es unerlässlich, neuartige wirksame CAR-T-Zelltherapien zur Bekämpfung von malignen T-Zell-Erkrankungen zu entwickeln.

  • CD5 wird konstitutiv auf normalen T-Zellen exprimiert und ist in etwa 85 % der malignen T-Zell-Erkrankungen vorhanden.9 Es enthält drei Cystein-reiche Scavenger-Rezeptor-Domänen (SRCR),10, 11, 12 die als inhibitorische Regulatoren sowohl des T-Zell-Rezeptors (TCR ) und B-Zell-Rezeptor (BCR)-Signalisierung und dienen als Ziel für evolutionäre immuntherapeutische Strategien gegen maligne T-Zell-Erkrankungen.13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 Darüber hinaus wird CD5 auch häufig in einigen bösartigen wobei die Expression in normalen Geweben auf Thymozyten, T-Zellen und eine kleine Subpopulation von B-Zellen (B1-Zellen) beschränkt ist.20,21
  • Die Daten aus einer klinischen Phase-I-Studie , die vom Baylor College of Medicine durchgeführt wurde, haben dies gezeigt CAR-T-Zellen, die ein von der Maus stammendes einzelkettiges variables Fragment (scFv) H65 enthielten, das auf CD5 abzielt, waren sicher und hatten eine Anti-Tumor-Aktivität bei Patienten mit r/r-T-Zell-Malignomen.9 Die Patienten, die eine objektive Reaktion nach Infusion ohne Erhalt geplant hämatopoetische Stammzelltransplantation mit ihrer latenten CD5+-Malignität nach einigen Wochen einen Rückfall erlitten.9 Verbesserungen der Wirksamkeit und Persistenz von CD5-gerichteten CAR-T-Zelltherapien für maligne T-Zell-Erkrankungen sind eindeutig dringend erforderlich.
  • Die begrenzte Lebensdauer von CAR-T-Zellen bei Patienten kann mit dem Brudermord von Anti-CD5-CAR-T-Zellen und humanen Anti-Maus-Antikörperantworten zusammenhängen, wohingegen die Anwendung von CD5-Knockout (CD5KO) vollständig humanem (FH) Antikörper-abgeleitetem CAR -T-Zellen können das Überleben und die optimale Funktion von CAR-T-Zellen verlängern.22, 23, 24, 25
  • Hier berichten wir über die Auswahl neuer variabler (VH) Domänen der schweren Kette von FH und die rationale Entwicklung einer Fratrizid-resistenten, CD5-gerichteten biepitopen CAR-T-Therapie. Unter Verwendung einer hochwertigen FH-Phagen-Display-Bibliothek, die intern entwickelt wurde und 8,32 × 1010 VH-Domänen enthält, erhielten wir durch Panning, primäres Screening und Identifizierung einige VHs, die spezifisch an rekombinantes CD5-Protein und Zelloberflächen-CD5 binden.
  • Wir stellten die Hypothese auf, dass die gleichzeitige Verwendung von VH-Domänen, die auf verschiedene Epitope abzielen, möglicherweise die Funktion von CAR-T-Zellen verbessern und das Risiko eines Tumorausbruchs aufgrund einer Antigenmutation minimieren könnte. Daher wurden durch kompetitive Bindungs-Fluoreszenz-aktivierte Zellsortierung (FACS)-Analyse FHVH1 und FHVH3, zwei VH-Domänen, die an unterschiedliche Epitope von CD5 binden, identifiziert.
  • Als nächstes haben wir zur Verlängerung der CAR-T-Zellpersistenz eine 4-1BB co-stimulatorische Domäne im Design des CAR-Konstrukts angewendet, von der berichtet wurde, dass sie die Fähigkeit besitzt, das Überleben von CAR-T-Zellen zu fördern26,27 und anschließend den CD5-Knockout optimiert und lentivirale Transduktionsschritte zur erfolgreichen Generierung von Anti-CD5-CAR-T-Zellen, die Brudermord widerstehen. Darüber hinaus wurden die Funktionen der Degranulation, Zytotoxizität, Zytokinfreisetzung, Expansion und Persistenz von H65-, FHVH1-, FHVH3- und biepitopen FHVH3/VH1-CAR-T-Zellen in vitro und in vivo bestätigt.
  • FHVH3/VH1 CAR-T-Zellen zeigten starke und länger anhaltende Wirksamkeits- und Spezifitätsprofile, die denen von klinisch verwendetem H65 ähneln. Dieses biepitope CAR wird derzeit für die weitere Evaluierung und Entwicklung vorbereitet.

Ergebnisse

Screening und Selektion von FH-CD5-spezifischen VH-Domänen

Ein Diagramm des Screening- und Auswahlverfahrens ist in Abbildung 1Adargestellt. Die VH-Domänen wurden aus einer Phagen-Display-Bibliothek, die sowohl naive als auch synthetische menschliche VH-Domänen umfasste, durch drei Protein-Panning-Runden nach der Anreicherung gescreent (Tabelle S1). Insgesamt 92 monoklonale Antikörper wurden für den Enzyme-linked Immunosorbent Assay (ELISA) ausgewählt und unter Verwendung von CD5+ Jurkat- und CD5− Raji-Zellen für das FACS-Screening validiert, von denen 38 Klone spezifisch an das CD5-Protein banden, ohne an andere Kontrollproteine ​​zu binden, und die repräsentative Klone sind in Abbildung 1B gezeigt. Nach der Sequenzierung wurden 29 einzigartige Klone identifiziert. Die Bindungsspezifität dieser 29 Klone mit zusätzlichen CD5+/–-Zelllinien wurde weiter durch FACS-Analyse charakterisiert.

Anti-human CD5 Monoclonal Antibody PE Conjugated, Flow Validated

FC00480-PE BosterBio 25 Tests, 100 Tests, 200 Tests 183.6 EUR

Anti-Human CD44 Monoclonal Antibody PE Conjugated, Flow Validated

FC00052-PE BosterBio 25 Tests, 100 Tests, 200 Tests 183.6 EUR

Anti-Human CD28 Monoclonal Antibody PE Conjugated, Flow Validated

FC00065-PE BosterBio 25 tests, 100 tests 171.6 EUR

Anti-Human CD40 Monoclonal Antibody PE Conjugated, Flow Validated

FC00068-PE BosterBio 25 Tests, 100 Tests, 200 Tests 178.8 EUR

Anti-human CD14 Monoclonal Antibody PE Conjugated, Flow Validated

FC00137-PE BosterBio 25 Tests, 100 Tests, 200 Tests 183.6 EUR

Anti-human CD11b Monoclonal Antibody PE Conjugated, Flow Validated

FC00144-PE BosterBio 25 Tests, 100 Tests, 200 Tests 183.6 EUR

Anti-human CD19 Monoclonal Antibody PE Conjugated, Flow Validated

FC00154-PE BosterBio 25 Tests, 100 Tests, 200 Tests 129.6 EUR

Anti-Human CD54 Monoclonal Antibody PE Conjugated, Flow Validated

FC00171-PE BosterBio 25 Tests, 100 Tests, 200 Tests 170.4 EUR

Anti-human CD38 Monoclonal Antibody PE Conjugated, Flow Validated

FC00193-PE BosterBio 25 Tests, 100 Tests, 200 Tests 183.6 EUR

Anti-human CD25 Monoclonal Antibody PE Conjugated, Flow Validated

FC00214-PE BosterBio 25 Tests, 100 Tests, 200 Tests 150 EUR

Anti-Human CD86 Monoclonal Antibody PE Conjugated, Flow Validated

FC00220-PE BosterBio 25 Tests, 100 Tests, 200 Tests 183.6 EUR

Anti-human CD4 Monoclonal Antibody PE Conjugated, Flow Validated

FC00344-PE BosterBio 25 Tests, 100 Tests, 200 Tests 135.6 EUR

Anti-Human CD11c Monoclonal Antibody PE Conjugated, Flow Validated

FC00357-PE BosterBio 25 Tests 163.2 EUR

Anti-human CD45 Monoclonal Antibody PE Conjugated, Flow Validated

FC00555-PE BosterBio 25 Tests, 100 Tests, 200 Tests 141.6 EUR

Anti-human CD2 Monoclonal Antibody PE Conjugated, Flow Validated

FC00570-PE BosterBio 25 Tests, 100 Tests, 200 Tests 183.6 EUR

Anti-human CD71 Monoclonal Antibody PE Conjugated, Flow Validated

FC00591-PE BosterBio 25 Tests, 100 Tests, 200 Tests 183.6 EUR

Anti-human CD62L Monoclonal Antibody PE Conjugated, Flow Validated

FC00652-PE BosterBio 25 Tests, 100 Tests, 200 Tests 183.6 EUR

Anti-human CD59 Monoclonal Antibody PE Conjugated, Flow Validated

FC00914-PE BosterBio 25 Tests, 100 Tests, 200 Tests 183.6 EUR

Anti-Human CD81 Monoclonal Antibody PE Conjugated, Flow Validated

FC01281-PE BosterBio 25 Tests, 100 Tests, 200 Tests 170.4 EUR

Anti-human CD117 Monoclonal Antibody PE Conjugated, Flow Validated

FC01335-PE BosterBio 25 Tests, 100 Tests, 200 Tests 171.6 EUR

Anti-human CD16 Monoclonal Antibody PE Conjugated, Flow Validated

FC01408-PE BosterBio 25 Tests, 100 Tests, 200 Tests 183.6 EUR

Anti-human CD32 Monoclonal Antibody PE Conjugated, Flow Validated

FC01450-PE BosterBio 25 Tests, 100 Tests, 200 Tests 183.6 EUR

Anti-human CD90 Monoclonal Antibody PE Conjugated, Flow Validated

FC01818-PE BosterBio 25 Tests, 100 Tests, 200 Tests 219.6 EUR

Anti-human CD7 Monoclonal Antibody PE Conjugated, Flow Validated

FC01974-PE BosterBio 25 Tests, 100 Tests, 200 Tests 183.6 EUR

Anti-human CD235a Monoclonal Antibody PE Conjugated, Flow Validated

FC02184-PE BosterBio 25µg, 100µg 198 EUR

Anti-human CD8 Monoclonal Antibody PE Conjugated, Flow Validated

FC02236-PE BosterBio 25 Tests, 100 Tests, 200 Tests 136.8 EUR

Anti-human CD13 Monoclonal Antibody PE Conjugated, Flow Validated

FC02591-PE BosterBio 25 Tests, 100 Tests, 200 Tests 183.6 EUR

Anti-human CD3 Monoclonal Antibody PE Conjugated, Flow Validated

FC02675-PE BosterBio 25 Tests, 100 Tests, 200 Tests 132 EUR

Anti-human CD20 Monoclonal Antibody PE Conjugated, Flow Validated

FC03780-PE BosterBio 25 Tests, 100 Tests, 200 Tests 178.8 EUR

Anti-human CD10 Monoclonal Antibody PE Conjugated, Flow Validated

FC04065-PE BosterBio 25 Tests, 100 Tests, 200 Tests 183.6 EUR

Anti-human CD57 Monoclonal Antibody PE Conjugated, Flow Validated

FC09548-PE BosterBio 25 Tests, 100 Tests, 200 Tests 183.6 EUR

Anti-human HLA-DR Monoclonal Antibody PE Conjugated, Flow Validated

FC00568-PE BosterBio 25 Tests, 100 Tests, 200 Tests 183.6 EUR

Anti-human CD55/Daf Monoclonal Antibody PE Conjugated, Flow Validated

FC00910-PE BosterBio 25 Tests, 100 Tests, 200 Tests 183.6 EUR

Anti-Human HLA-ABC Monoclonal Antibody PE Conjugated, Flow Validated

FC20056-PE BosterBio 25 Tests, 100 Tests, 200 Tests 183.6 EUR

Anti-Human CD3 Monoclonal Antibody PE Conjugated, Flow Validated

FC02675-PE-1 BosterBio 25 Tests, 100 Tests, 200 Tests 93.6 EUR

Anti-Human CD3 Monoclonal Antibody PE Conjugated, Flow Validated

FC04405-4-PE BosterBio 25 tests, 100 tests, 500 tests 136.8 EUR

Anti-Mouse TER-119 Monoclonal Antibody PE Conjugated, Flow Validated

FC30403-PE BosterBio 25ug, 100ug 144 EUR

Anti-human CD33/Siglec 3 Monoclonal Antibody PE Conjugated, Flow Validated

FC01508-PE BosterBio 25 Tests, 100 Tests, 200 Tests 183.6 EUR

Anti-Human CD62L Monoclonal Antibody PE-Cy7 Conjugated, Flow Validated

FC00652-PE-Cy7 BosterBio 25tests, 100tests, 200tests 225.6 EUR

Anti-Human CD33 Monoclonal Antibody PE-Cy7 Conjugated, Flow Validated

FC01508-PE-Cy7 BosterBio 25 Tests, 100 Tests, 200 Tests 234 EUR

Mouse Anti-human CD7 Monoclonal Antibody PE Conjugated, Flow Validated

FC01974-1-PE BosterBio 25 Tests, 100 Tests, 200 Tests 183.6 EUR

Anti-Human CD3 Monoclonal Antibody PE-Cy7 Conjugated, Flow Validated

FC02675-PE-Cy7 BosterBio 25 Tests, 100 Tests, 200 Tests 192 EUR

Anti-human CD10 Monoclonal Antibody PE-Cy7 Conjugated, Flow Validated

FC04065-PE-Cy7 BosterBio 25 Tests, 100 Tests, 200 Tests 199.2 EUR

Anti-Mouse CD4 Monoclonal Antibody PE-Cyanine7 Conjugated, Flow Validated

FC00344-PE-Cy7 BosterBio 25ug, 100ug 164.4 EUR

Anti-Human/Mouse CD45R (B220) Monoclonal Antibody PE Conjugated, Flow Validated

FC00555-2-PE BosterBio 25ug, 100ug 115.2 EUR

Anti-Human HLA-DR Monoclonal Antibody PE-Cy7 Conjugated, Flow Validated

FC01340-PE-Cy7 BosterBio 25tests, 100tests, 200tests 225.6 EUR

Anti-Mouse CD4 Monoclonal Antibody PE-Cyanine7 Conjugated, Flow Validated

FC00344-2-PE-Cy7 BosterBio 25ug, 100ug 157.2 EUR

Anti-human CD5 Monoclonal Antibody APC Conjugated, Flow Validated

FC00480-APC BosterBio 25 Tests, 100 Tests, 200 Tests 211.2 EUR

Anti-human CD5 Monoclonal Antibody Biotin Conjugated, Flow Validated

FC00480-Biotin BosterBio 100µg 279.6 EUR

Anti-human CD5 Monoclonal Antibody FITC Conjugated, Flow Validated

FC00480-FITC BosterBio 25 Tests, 100 Tests, 200 Tests 164.4 EUR

Anti-human CD5 Monoclonal Antibody Unconjugated, Flow Validated

FC00480 BosterBio 100µg, 500µg 170.4 EUR

Anti-human CD5 Monoclonal Antibody PerCP-Cy5.5 Conjugated, Flow Validated

FC00480-PerCP-Cy5.5 BosterBio 25 Tests, 100 Tests, 200 Tests 240 EUR

Anti-Mouse Ly-6G (Gr-1) Monoclonal Antibody PE-Cyanine7 Conjugated, Flow Validated

FC30404-1-PE-Cy7 BosterBio 25ug, 100ug 157.2 EUR

Anti-Human CD44 Monoclonal Antibody Unconjugated Conjugated, Flow Validated

FC00052 BosterBio Various Sizes 170.4 EUR

Anti-Human CD44 Monoclonal Antibody FITC Conjugated, Flow Validated

FC00052-FITC BosterBio 25 Tests, 100 Tests, 200 Tests 156 EUR

Anti-Human CD28 Monoclonal Antibody FITC Conjugated, Flow Validated

FC00065-FITC BosterBio 25 tests, 100 tests 157.2 EUR

Anti-Human CD40 Monoclonal Antibody Unconjugated Conjugated, Flow Validated

FC00068 BosterBio Various Sizes 170.4 EUR

Anti-Human CD14 Monoclonal Antibody Unconjugated Conjugated, Flow Validated

FC00137-1 BosterBio Various Sizes 163.2 EUR

Anti-human CD14 Monoclonal Antibody APC Conjugated, Flow Validated

FC00137-APC BosterBio 25 Tests, 100 Tests, 200 Tests 198 EUR

Anti-human CD14 Monoclonal Antibody Biotin Conjugated, Flow Validated

FC00137-Biotin BosterBio 100µg 279.6 EUR

Anti-human CD14 Monoclonal Antibody FITC Conjugated, Flow Validated

FC00137-FITC BosterBio 25 Tests, 100 Tests, 200 Tests 164.4 EUR

Anti-Human CD14 Monoclonal Antibody FITC Conjugated, Flow Validated

FC00137-FITC-1 BosterBio 25 Tests, 100 Tests, 200 Tests 114 EUR

Anti-Human CD14 Monoclonal Antibody mFluor450 Conjugated, Flow Validated

FC00137-mFluor450 BosterBio 25tests, 100tests, 200tests 213.6 EUR

Anti-Human CD14 Monoclonal Antibody mFluor540 Conjugated, Flow Validated

FC00137-mFluor540 BosterBio 25tests, 100tests, 200tests 196.8 EUR

Anti-human CD14 Monoclonal Antibody PerCP Conjugated, Flow Validated

FC00137-PerCP BosterBio 100 Tests, 200 Tests 399.6 EUR

Anti-human CD11b Monoclonal Antibody APC Conjugated, Flow Validated

FC00144-APC BosterBio 25 Tests, 100 Tests, 200 Tests 183.6 EUR

Anti-human CD11b Monoclonal Antibody Biotin Conjugated, Flow Validated

FC00144-Biotin BosterBio 100µg 182.4 EUR

Anti-human CD11b Monoclonal Antibody FITC Conjugated, Flow Validated

FC00144-FITC BosterBio 25 Tests, 100 Tests, 200 Tests 164.4 EUR

Anti-Human CD11b Monoclonal Antibody iFluor647 Conjugated, Flow Validated

FC00144-iFluor647 BosterBio 25tests, 100tests, 200tests 196.8 EUR

Anti-Human CD11b Monoclonal Antibody mFluor450 Conjugated, Flow Validated

FC00144-mFluor450 BosterBio 25 Tests, 100 Tests 183.6 EUR

Anti-human CD11b Monoclonal Antibody PerCP Conjugated, Flow Validated

FC00144-PerCP BosterBio 25 Tests, 100 Tests, 200 Tests 225.6 EUR

Anti-human CD19 Monoclonal Antibody APC Conjugated, Flow Validated

FC00154-APC BosterBio 25 Tests, 100 Tests, 200 Tests 166.8 EUR

Anti-human CD19 Monoclonal Antibody Biotin Conjugated, Flow Validated

FC00154-Biotin BosterBio 100µg 182.4 EUR

Anti-human CD19 Monoclonal Antibody FITC Conjugated, Flow Validated

FC00154-FITC BosterBio 25 Tests, 100 Tests, 200 Tests 122.4 EUR

Anti-human CD19 Monoclonal Antibody PerCP Conjugated, Flow Validated

FC00154-PerCP BosterBio 25 Tests, 100 Tests, 200 Tests 225.6 EUR

Anti-Human CD54 Monoclonal Antibody Unconjugated Conjugated, Flow Validated

FC00171 BosterBio 100 ug, 500 ug 170.4 EUR

Anti-Human CD54 Monoclonal Antibody APC Conjugated, Flow Validated

FC00171-APC BosterBio 25 Tests, 100 Tests, 200 Tests 198 EUR

Anti-Human CD54 Monoclonal Antibody FITC Conjugated, Flow Validated

FC00171-FITC-1 BosterBio 25 Tests, 100 Tests, 200 Tests 156 EUR

Anti-human CD38 Monoclonal Antibody APC Conjugated, Flow Validated

FC00193-APC BosterBio 25 Tests, 100 Tests, 200 Tests 198 EUR

Anti-human CD38 Monoclonal Antibody Biotin Conjugated, Flow Validated

FC00193-Biotin BosterBio 100µg 182.4 EUR

Anti-human CD38 Monoclonal Antibody FITC Conjugated, Flow Validated

FC00193-FITC BosterBio 25 Tests, 100 Tests, 200 Tests 164.4 EUR

Anti-Human CD38 Monoclonal Antibody PerCP Conjugated, Flow Validated

FC00193-PerCP BosterBio 25tests, 100tests, 200tests 121.2 EUR

Anti-human CD25 Monoclonal Antibody APC Conjugated, Flow Validated

FC00214-APC BosterBio 25 Tests, 100 Tests, 200 Tests 183.6 EUR

Anti-human CD25 Monoclonal Antibody Biotin Conjugated, Flow Validated

FC00214-Biotin BosterBio 100µg 279.6 EUR

Anti-human CD25 Monoclonal Antibody FITC Conjugated, Flow Validated

FC00214-FITC BosterBio 25 Tests, 100 Tests, 200 Tests 129.6 EUR

Anti-Human CD86 Monoclonal Antibody Unconjugated Conjugated, Flow Validated

FC00220 BosterBio Various Sizes 266.4 EUR

Anti-Human CD86 Monoclonal Antibody APC Conjugated, Flow Validated

FC00220-APC BosterBio 25 Tests, 100 Tests, 200 Tests 211.2 EUR

Anti-human CD4 Monoclonal Antibody APC Conjugated, Flow Validated

FC00344-APC BosterBio 25 Tests, 100 Tests, 200 Tests 156 EUR

Anti-human CD4 Monoclonal Antibody Biotin Conjugated, Flow Validated

FC00344-Biotin BosterBio 100µg 182.4 EUR

Anti-human CD4 Monoclonal Antibody FITC Conjugated, Flow Validated

FC00344-FITC BosterBio 25 Tests, 100 Tests, 200 Tests 115.2 EUR

Anti-Human CD4 Monoclonal Antibody iFluor647 Conjugated, Flow Validated

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Anti-Human CD4 Monoclonal Antibody mFluor450 Conjugated, Flow Validated

FC00344-mFluor450 BosterBio 25 tests, 100 tests, 200 tests 196.8 EUR

Anti-Human CD11c Monoclonal Antibody Unconjugated Conjugated, Flow Validated

FC00357 BosterBio Various Sizes 170.4 EUR

Anti-Human Fli1 Monoclonal Antibody APC Conjugated, Flow Validated

FC00399-APC BosterBio 100ug 446.4 EUR

Anti-Human CD45RO Monoclonal Antibody Unconjugated Conjugated, Flow Validated

FC00555-1 BosterBio Various Sizes 170.4 EUR

Anti-Human CD45RO Monoclonal Antibody Unconjugated Conjugated, Flow Validated

FC00555-2 BosterBio Various Sizes 505.2 EUR

Anti-Human CD45 Monoclonal Antibody Unconjugated Conjugated, Flow Validated

FC00555-3 BosterBio Various Sizes 121.2 EUR

Anti-human CD45 Monoclonal Antibody APC Conjugated, Flow Validated

FC00555-APC BosterBio 25 Tests, 100 Tests, 200 Tests 183.6 EUR

Anti-human CD45 Monoclonal Antibody Biotin Conjugated, Flow Validated

FC00555-Biotin BosterBio 100µg 182.4 EUR

Anti-human CD45 Monoclonal Antibody FITC Conjugated, Flow Validated

FC00555-FITC BosterBio 25 Tests, 100 Tests, 200 Tests 136.8 EUR

Von diesen wurde bestätigt, dass vier Klone (FHVH1–4) an eine andere vom Menschen stammende CD5+-Zelllinie (CCRF-CEM; Abbildung 1C) binden. Um ihre Bindungsaffinitäten zum CD5-Antigen weiter zu messen, wurden diese VH-Klone zusammen mit H65 im Format VH/scFv-Human-Immunglobulin-Fc-Fragment (hFc) oder VH/scFv-Kaninchen-Immunglobulin-Fc-Fragment (rFc) exprimiert und gereinigt. Die Bindungsaffinität wurde unter Verwendung des Octet96e-Systems bestimmt. FHVH1 (KD = 1,63 × 10 –9 M), FHVH2 (KD = 8,32 × 10 –9 M) und FHVH3 (KD = 1,39 × 10 –9 M) zeigten im Vergleich zu H65 ( KD = 6,53 × 10 –10 M), obwohl FHVH4 (KD = 2,47 × 10 –8 M) eine wesentlich niedrigere Affinität als die obigen Klone aufwies.

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