celculturen voor de beste opbrengst van virus

celculturen voor de beste opbrengst van virus

Magnetische nanodeeltjes geladen menselijke vetafgeleide mesenchymale cellen sferoïden in zwevende traditie

• Magnetische nanodeeltjes (MNP) worden intensief onderzocht voor biomedische doeleinden, die toe te schrijven zijn aan hun geweldige biocompatibiliteit en aanpasbaarheid van het magnetische gebied (MF). Driedimensionale sferoïde traditie van ADSC verbetert de proliferatie en differentiatie van stamcellen, waardoor hun potentieel voor wetenschappelijke doeleinden toeneemt.

• Bij dit onderzoek wilden we detecteren of de door MF zwevende traditie van ADSC geladen met eigen MNP de eigenschappen van ADSC behoudt en hun prestaties verbetert.

• Zwevende ADSC-MNP-vormige aggregaten met een grotere hoeveelheid en een lagere hoeveelheid in vergelijking met niet-geheven aggregaten. ADSC-MNP van zwevende sferoïde vertoonde een grotere levensvatbaarheid, proliferatie en mobiliteit in vergelijking met niet-opgeheven en 2D-traditie. Zwevende en niet-verheven ADSC-MNP-sferoïden ondergingen drie afstammingsdifferentiatie, wat bewaarde ADSC-stamheid aantoont.

• Kwantitatieve osteogenese bevestigde gerelateerde waarden in MNP-geladen zwevende en niet-verhoogde sferoïden. Vitale toename in adipogene conversie werd opgemerkt voor alle 3D-formuleringen. Chondrogene omzetting in zwevende en niet-verhoogde sferoïden produceerde een vergelijkbare verhouding glucosaminoglycaan (GAG) / DNA.

Verhoogde chondrogenese kan worden opgemerkt voor ADSC-MNP in elke zwevende en niet-verhoogde situatie. Gezamenlijk genomen behouden ADSC-MNP zwevende sferoïden hun stamheid en vertonen ze superieure levensvatbaarheid van de cellen en migrerende mogelijkheden.

• Bovendien zal de strategie aanhoudend de manoeuvreerbaarheid van de sferoïde vergroten, wat waarschijnlijk grootschalige productie en automatisering mogelijk maakt. De zwevende sferoïde traditie van ADSC-MNP zal aanvullend worden onderzocht op talrijke bruikbaarheid in regeneratieve geneesmiddelen en orgaanmodellering.

Glucosesensoren met schermafdruk, gemodificeerd met cellulose-nanokristallen (CNC’s) voor celcultuurbewaking

Glucosesensoren zijn waarschijnlijk nuttige instrumenten voor het bewaken van de glucosefocus in het medium van de celtraditie. Hier presenteren we een gloednieuwe, goedkope en reproduceerbare sensor, voornamelijk gebaseerd op cellulose-gebaseerde materialen, 2,2,6,6-tetramethylpiperidine-1-oxyl (TEMPO) geoxideerde cellulose nanokristallen (CNC’s).

Dit nieuwe biocompatibele en inerte nanomateriaal wordt gebruikt als een polymere matrix om glucoseoxidase te immobiliseren en te stabiliseren binnen de fabricage van een reproduceerbare, operationeel veilige, uiterst selectieve, kosteneffectieve, gezeefdrukte glucosesensor. De sensoren hebben een lineaire variatie van 0,1-2 mM (R2 = 0,999) en een gevoeligheid van 5,7 ± 0. Drie µA cm-2 ∙ mM-1.

De detectielimiet is 0,004 mM en de kwantificeringslimiet is 0,015 mM. De sensor behoudt 92,3% van de voorlopige huidige respons na 30 opeenvolgende metingen in een normale glucose-resolutie van 1 mM, en heeft een houdbaarheid van 1 maand terwijl hij overmatige selectiviteit behoudt. We laten de zinvolle bruikbaarheid van de sensor zien door het glucoseverbruik van een fibroblastceltraditie gedurende een aantal dagen te volgen.

skinsandbones
skinsandbones

celculturen voor de beste opbrengst van virus

• Megalocytivirus, een infectie, is een ernstig risico in de aquacultuur van steenbrasems in Korea. Om een ​​extreem geconcentreerd megalocytivirus te leveren, zijn bij dit onderzoek belangrijke cellen, gevestigde cellijn en aanhoudend besmette cellijn gebruikt.

• Megalocytivirus werd geïnoculeerd in belangrijke vincelculturen van paarse zeebrasem (Pagrus main), steenbrasem (Oplegnathus fasciatus), olijfbot (Paralichthys olivaceus) en zwarte zeebrasem (Acanthopagrus schlegelii) en geproduceerd in gerelateerde concentraties van 1099 – 9,88 virusdeeltjes / ml in alle culturen terwijl 107,31 virale deeltjes / ml werden geproduceerd in de cellijn van de gruntvin (GF). Aangezien de traditie van uitsluitend paarse zeebrasemvinnen meer dan 100 keer geschikt was voor subcultuur, werd het ingeburgerd in de Pagrus main fin (PMF) cellijn.

• Een aanhoudend verontreinigde PMF-cellijn (PI-PMF) werd verkregen door elke 7 dagen gestaag te subkweken als een batch-traditiesysteem (PI-PMF-B) na infectie met megalocytivirus. Virus in supernatant van PI-PMF-B werd in overmatige concentraties gehouden gedurende meer dan 50 opeenvolgende subculturen in een relatief klein bereik van 1033 tot 108,94 virale deeltjes / ml met een overmatige mate van CPE. Voor een extra milieuvriendelijke en handige productie is een semi-batch traditiesysteem (PI-PMF-S) ontwikkeld waarin traditionele media worden uitgewisseld met tussenpozen van drie dagen zonder subcultuur voor meer dan 50 media-uitwisselingen.

• Ongeacht de lage virusproductiviteit in een enkele cel (met name virusproductiviteit, SVP), was de hoeveelheid hele cellen verhoogd in PI-PMF-S, waardoor we effectief een veel grotere virusfocus konden ontvangen (1056 tot 109,75 virale deeltjes / ml) dan in PMF-B. Dat is het primaire onderzoek om gedetailleerde nieuwe strategieën te rapporteren voor een gestage en milieuvriendelijke productie van overmatige concentraties megalocytivivrus met karakterisering van virale voortplanting in aanhoudend besmette cellen.

 

Recombinant DNA
Recombinant DNA is een DNA-molecuul dat bestaat uit twee verschillende soorten die worden ingebracht om een ​​nieuwe genetische combinatie te produceren die van waarde is voor de geneeskunde, de wetenschap, de industrie en de landbouw. Het is gemakkelijk om een ​​DNA-monster uit een verzameling cellen te isoleren. Zelfs een klein weefselmonster bevat vele kilometers DNA. Met behulp van deze technologie is het mogelijk om een ​​gen of een ander DNA-segment te isoleren, waardoor onderzoekers de nucleotidesequentie kunnen bepalen en de transcripties ervan kunnen bestuderen, en de gemodificeerde sequentie opnieuw in een levend organisme kunnen invoegen.

DNA-klonen.
Het is een groep van individuele cellen of organismen die afstammen van één progenitor. Dit betekent dat de leden van de kloon genetisch identiek zijn omdat het elke keer identieke dochtercellen produceert. Het biedt wetenschappers de mogelijkheid om veel kopieën te maken die een DNA-kloon vormen. Het kleine replicerende molecuul wordt een DNA-vector genoemd en de meest gebruikte vectoren zijn. Plasmiden maken geen deel uit van het belangrijkste cellulaire genoom, maar het draagt ​​genen die de gastheercel nuttige eigenschappen geven, zoals geneesmiddelresistentie. Paringsvermogen en toxineproductie.

De kloon maken.

Er zijn enkele stappen bij het klonen die als volgt zijn.
Het wordt geëxtraheerd uit het organisme dat wordt bestudeerd en in kleine fragmenten gesneden op basis van de grootte. Het wordt bereikt door het DNA te splitsen met een restrictie-enzym. De meest bruikbare restrictie-enzymen zijn vreemde rode sneden en ze laten een enkelstrengs overhang achter op de plaats van splitsing. Het resulterende molecuul wordt recombinant DNA genoemd. De volgende stap in het kloonproces is om de vector in dezelfde beperking te knippen.

Snijd vector-DNA en meng in een reageerbuis en de complementaire uiteinden van beide soorten DNA verenigen zich willekeurig. Nu is deze oplossing Mixtec met levende bacteriecellen die speciaal zijn behandeld om hun cellen beter doorlaatbaar te maken voor DNA. Het oorspronkelijke mengsel van getransformeerde bacteriecellen wordt in een platte schaal op het oppervlak van een groeimedium uitgespreid, zodat de cellen van elkaar worden gescheiden. Deze verzameling klonen wordt een DNA-bibliotheek genoemd.

De kloon isoleren
om de kloon van een bepaald gen of een van belang zijnde DNA-sequentie te verkrijgen, moet worden gekloond. De volgende stappen na het klonen zijn om die kloon te isoleren met andere leden van de bibliotheek. De cellen worden gescheurd en het DNA wordt gescheiden in een enkele streng en de sonde wordt ook gescheiden in enkele strengen en gelabeld met radioactieve fosfor.
Daarna wordt het membraan gedroogd en tegen een vel stralingsgevoelige film geplaatst en de aanwezigheid en locatie van de gewenste kloon aangekondigd.

DNA sequentie.
Om de nucleotidesequentie te bepalen is het DNA-segment gekloond. Het is het meest fundamentele kennisniveau van genen en het is de blauwdruk die de instructies bevat om op het organisme voort te bouwen en geen begrip van evolutie.

Leave a Reply

Your email address will not be published. Required fields are marked *